Autoklaavi on enemmän tai vähemmän samanlainen kuin painekattila, paitsi että autoklaavi liikkuu valppaammin. Tämä selittyy huolella, että työkalut eivät sisällä mikro-organismeja, joten steriloinnissa ei ole juurikaan tilaa virheille. Autoklaavissa on pääosasto, johon steriloitavat välineet sijoitetaan. Tämän jälkeen kammio suljettiin ja laite käynnistettiin ohjaamaan tiheä höyrypilvi osastoon. Tämän prosessin aikana kammion lämpötila ja paine alkavat nousta, tavoitteena saavuttaa ja ylläpitää noin 120 celsiusastetta.
Mutta työnnetäänkö höyryä kammion puhdistuslaitteeseen näin? Mitä tapahtuu kuolleille mikrobeille? Autoklaavi on edistyneempi, koska se sisältää putkia ja venttiilejä, jotka mahdollistavat ilmanvaihdon sisällä. Nämä putket päästävät puhdasta höyryä sisään kammioon ja työntävät saastuneen ilman ulos kammiosta. Tyypillinen sterilointiprosessi vaatii noin 15 minuuttia höyryä 120 celsiusasteessa, mutta huomaa, että tämä ei ole vakio, koska se riippuu steriloitavan laitteen tyypistä. Jotkut yhdistelmät tehdään ylimääräisellä kuumalla höyryllä, mikä mahdollistaa materiaalin steriloinnin lyhyemmässä ajassa. Äärimmäisen korkeat lämpötilat tuhoavat mikrobien sisäosat ja eliminoivat siten eloonjäämismahdollisuudet. Sterilointijakson jälkeen höyry poistetaan ja painetta alennetaan asteittain. Tehokas sterilointi riippuu kylläisen höyryn käytöstä saastuneen ilman syrjäyttämiseen, joten altistuminen tälle puhtaalle höyrylle varmistaa tehokkaan steriloinnin.
